Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом дисков

Язва

7.7.5. Определение антибиотиков в сыворотке крови, моче и других биологических жидкостях

Эти
методы используют для определения
биологической активности антибиотиков
и их концентрации в тканях макроорганизма.
На практике используют два метода.

Метод
серийных разведений.
Готовят ряд разведений эталонного
антибиотика на жидкой питательной среде
и параллельно исследуемый материал. Во
все пробирки вносят тестовый микроорганизм
в определенной концентрации. Учитывают
результаты по помутнению среды. Определяют
концентрацию антибиотика умножением
наибольшего разведения исследуемой
жидкости, задерживающей рост бактерий,
на минимальную концентрацию эталонного
антибиотика, задерживающего рост.

https://www.youtube.com/watch?v=ytcopyrightru

Метод
диффузии в агар.
Этот метод точнее, чем метод серийных
разведений и чаще используется на
практике. Готовят чашку Петри с двумя
слоями агара. Первый слой — голодный
агар, второй слой состоит из агара в
смеси с тест-культурой. После застывания
второго слоя агара на его поверхности
делают 6 лунок.

В половину из них вносят
разведения испытуемого раствора, а в
остальные – стандартный раствор. Пробы
для повышения точности дублируют.
Размеры зон задержки роста тест-культуры
после инкубации измеряют и производят
расчет активности (концентрации)
антибиотиков с использованием расчетных
таблиц или стандартных кривых.

Культивирование спирохет

1. Культивирование
спирохет на питательных средах

  • среда Нагучи (2% агар, 1 часть
    асцита, кусочки почек кролика, средапокрывается слоем вазелинового
    масла);

  • среда Аристовского (кроличья
    сыворотка, кусочек мозговой ткани подслоем вазелинового масла);

  • среда Уленгута (дистиллированная
    вода с сывороткой илиантикоагулянтом);

  • среда Гельтцера
    (инактивированная сыворотка кролика,
    физ. раствор,кусочки
    куриного белка, 2 — 3 капли цитратной
    крови кролика или человека).

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом дисков

Трепонемы с большим трудом
культивируются на сложных питательных
средах. При длительном выращивании на
искусственных питательных средах они
теряют вирулентность. Такие штаммы
трепонем называются культуральными.

2. Культивирование
в развивающемся 7-8 дневном курином
эмбрионе.

3. Интратестикулярное
заражение кролика-самца и культивирование
трепонем в яичках.

7.8. Ограничение развития устойчивости к противобактериальным препаратам

— применять только
при наличии показаний,

— назначать
их в определенных дозах – небольшие
дозы антибиотиков способствуют селекции
устойчивых клонов микроорганизмов,

— соблюдать интервалы
между введениями,

— применять в
течение определенного времени;

— комбинировать
препараты только по показаниям, например,
при туберкулезе; смешанной полимикробной
инфекции; тяжелых, неотложных состояниях
и т. п.;

— постоянно
контролировать уровень резистентности
микроорганизмов
у пациентов стационаров и амбулаторных
больных;

— уменьшить
использование антибиотиков в клинической
практике, животноводстве и т.п.;

https://www.youtube.com/watch?v=https:tv.youtube.com

— не
использовать новые препараты до тех
пор, пока проявляют эффективность уже
используемые средства.

Питательные среды для культивирования лептоспир

  • водно-сывороточная среда
    Уленгута (водопроводную воду стерилизуют,
    добавляют свежую инактивированную при
    56 0С 30 мин. кроличью сыворотку);

  • среда Форварта-Вольфа
    (дистиллированная вода, хлористый
    натрий, пептон, фосфорная (буферная
    смесь). Перед посевом в пробирки со
    средой добавить инактивированную
    кроличью сыворотку;

  • полужидкая агаровая среда
    (вода, агар-агар, кипятить 30 мин., разлить
    в пробирки, стерилизовать кипячением
    30 мин., добавить стерильную сыворотку
    кролика, подогреть при 56 0С
    30 мин. для инактивации;

  • среда Терских — для
    исследования воды на наличие лептоспир
    (к исследуемой воде добавить
    фосфатно-буферную смесь, желток свежего
    куриного яйца, расплавленный слабощелочной
    мясо-пептонный агар).

Приложение 3

Приложение 3

IX. Грамположительные кокки

Классификация

Семейство
Neisseriaceae,
род
Neisseria,
вид
Neisseria
meningitidis.

Вызывают тяжелое
острое инфекционное антропонозное
заболевание, протекающее в виде
эпидемического цереброспинального
менингита, менингоэнцефалита,
менингококкового сепсиса (менингококцемии)
или назофарингита.

Возбудитель был
выделен от больного менингитом в 1887 г.
А. Вексельбаумом.

Морфология

Грамотрицательные
диплококки бобовидной формы, обращенные
вогнутой поверхностью друг к другу
(напоминают кофейные зерна),
имеют множественные пили и фимбрии.

Возбудители
окружены наружной мембраной, состоящей
из белков, липидов и олигосахаридов.
Патогенные штаммы покрывает капсула,
прикрепленная к наружной мембране.

Спор
не имеют,
неподвижны.

Культуральные
свойства

Очень
требовательны к условиям культивирования,
на простых средах не растут. Растут на
средах с нативным белком (сывороточный,
шоколадный или кровяной агары) и
повышенной влажностью; среда должна
быть свежей и подогретой. Оптимум
температуры 370С.
Для культивирования необходимо наличие
5-10% углекислоты. На плотных средах через
48 ч образуют прозрачные, бесцветные
блестящие колонии без гемолиза; возможна
диссоциация на R- и S-формы.

Биохимические
свойства

По
типу дыхания аэробы или факультативные
анаэробы. Разлагают до кислоты глюкозу
и мальтозу, протеолитической
активности не проявляют.
Выделяют оксидазу и каталазу.

Антигеная
структура

Обладают
белковыми и полисахаридными АГ,
расположенными в клеточной стенке и
капсуле.

Антигенная
структура весьма вариабельна. Это
обусловлено высокой генетической
изменчивостью возбудителей со способностью
к внутрихромосомной рекомбинации и
генетическому обмену с другими бактериями.

По
капсульным полисахаридным антигенам
все менингококки подразделены на 13
серогрупп
(А, В, С, D, Е (29Е), Н, J, К, L, W (W135),
Х, Y,
Z).

Наиболее
вирулентными являются менингококки из
группы А, В, С, Х, W135. Представители группы
А вызывают эпидемические вспышки, групп
В, С и W
вызывают спорадические заболевания.

По
белковым АГ наружной мембраны они
подразделяются на серовары
(1-20).

Липоолигосахарид
(ЛОС) клеточной стенки менингококков
не имеет боковых углеводных цепей. По
нему различают 13 иммунотипов
менигококков.

Факторы патогенности

– пили
и белки наружных мембран
обеспечивают адгезию возбудителя к
эпителию слизистой оболочки носоглотки
и мозговых оболочек;

https://www.youtube.com/watch?v=ytcreatorsru

– полисахаридная
капсула
является основным фактором вирулентности,
обеспечивает выживание менигококков
в кровотоке,
защищает от фагоцитоза, действия
комплемента и антител;

– эндотоксин
– липоолигосахарид
клеточной стенки;
в отличие от других эндотоксинов способен
выделяться возбудителем в среду в
составе мембранных пузырьков; стимулирует
гиперпродукцию макрофагами и Т-клетками
провоспалительных цитокинов (ИЛ 1,
α-ФНО, ИЛ 8, ИЛ 12, γ-интерферона),
колониестимулирующих факторов;

– IgА-протеазы
разрушают секреторный Ig А в области
шарнирной части, подавляют местный
иммунитет;

– гиалуронидаза
и нейраминидаза
– ферменты инвазии;

– белки-рецепторы
к трансферрину и лактоферрину;
обеспечивают поступление ионов железа
в микробные клетки, что необходимо для
их размножения.

Резистентность

Менингококки
малоустойчивы во внешней среде,
погибают при высушивании через несколько
часов. Очень чувствительны к низким
температурам и ко всем дезинфицирующим
средствам (1% раствор фенола вызывает
их гибель в течение 1 мин).

Патогенез
и клиническая характеристика
менингоккоковой инфекции

Заболевание
антропонозное. Источники инфекции:
бактерионосители и пациенты с инфекцией.
Наиболее
восприимчивы к возбудителю дети младшего
возраста, особенно до одного года.

Пути
передачи – преимущественно
воздушно-капельный, в меньшей степени
контактный, входные ворота – носоглотка.

В
развитых странах болезнь обычно
вызывается штаммами серогрупп В и С, в
развивающихся – группы А (вызывают
вспышки инфекции) или, реже, группы С.

Наиболее
часто встречаются такие формы
менингококковой инфекции, как
бактерионосительство
и менингококковый назофарингит.
Существенно реже развиваются тяжелые
системные формы заболевания:
цереброспинальный менингит
и менингококкцемия
(сепсис). Считается что, на один случай
генерализованной инфекции приходится
до 5000 случаев носительства. В единичных
случаях могут возникать менингококковые
пневмонии, артриты и др.

Системные
менигококковые инфекции носят инвазивный
характер.

Менингококки
адсорбируются на эпителии и первоначально
вызывают местный процесс в виде воспаления
задней стенки глотки. Белки
наружных мембран возбудителя
взаимодействуют с сиалированными
мембранными рецепторами (CD46
и далее с CD66).
Это обеспечивает прочную адгезию
возбудителей и последующее их прохождение
через мембрану эпителиоцитов посредством
эндоцитоза. Аналогичным образом
менингококки проникают в эндотелиоциты
и фагоциты.

В
дальнейшем возбудитель проникает в
кровь и частично гибнет под действием
бактерицидных факторов. Капсула
способствует выживанию возбудителя в
этих условиях.

https://www.youtube.com/watch?v=ytpressru

При
недостаточном уровне АТ к менигококку
он гематогенно распространяется по
организму и попадает в ЦНС.

Происходит
выделение эндотоксина (ЛОС), который
стимулирует синтез большого количества
провоспалительных цитокинов. Эндотоксин,
наряду с другими факторами патогенности,
вызывает клинические проявления инфекции
вплоть до эндотоксического шока.
Генерализованное поражение сосудов
микроциркуляции, включая сосуды ЦНС,
приводит к ишемии органов и тканей и
гиперкоагуляции. В последнем случае
может развиваться синдром диссеминированного
внутрисосудистого свертывания
с
тромбозами и кровоизлияниями.

Инкубационный
период болезни в зависимости от формы
инфекции составляет от нескольких часов
до нескольких дней.

При
эпидемическом цереброспинальном
менингите
происходит
гнойное поражение мягких мозговых
оболочек.

Болезнь развивается
остро. Характерна лихорадка до 39-40оС,
головная боль, рвота, менингеальный
синдром, поражение черепно-мозговых
нервов. Летальность
при данной форме составляет от 1 до 5%,
особенно при развитии энцефалита. После
заболевания могут сохраняться остаточные
неврологические расстройства (до 10-20%
больных).

При генерализации
процесса развивается менингококцемия
или менингококковый сепсис – лихорадка,
озноб, головная боль, обильная сыпь за
счет поражения сосудистой стенки
поверхностных сосудов в виде «синеватых
паучков», возникают
кровоизлияния в надпочечники (синдром
Уотерхауза-Фридриксена),
нарушается свертывающая система крови.
При
молниеносных (фульминантных) формах
летальность может достигать 20-50% или
даже более.

Менингококковый
назофарингит
сходен с обычным катаральным воспалением
верхних дыхательных путей.

Наиболее
распространено бессимптомное носительство
менингококков. До
10% взрослых людей могут в течение жизни
периодически колонизироваться
менингококками и выделять их.

После
заболеваний возникает стойкий гуморальный
группо- и типоспецифический иммунитет.
Элиминация возбудителя осуществляется
комплементсвязывающими антителами за
счет активации комплемента по классическому
пути. У новорожденных пассивный
естественный иммунитет от матери
сохраняется до 3-5 месяцев.

Лабораторная
диагностика

Материал
зависит от формы инфекционного процесса.
Исследуют ликвор, кровь, а также слизь
из носоглотки при любой форме заболевания.
Материал для исследования берут до
начала лечения антибиотиками и
предохраняют его от неблагоприятных
факторов, особенно колебаний температуры.
Ликвор в норме прозрачный и при пункции
вытекает каплями, при менингите он
мутный и вытекает струей под давлением.

При
микроскопическом
методе
готовят мазки из осадка ликвора,
окрашивают по Граму и выявляют
грамотрицательные парные кокки внутри
фагоцитов и вне их.

Для
выявления антигена в ликворе ставят
реакцию преципитации, пассивной
гемагглютинации с антительным
эритроцитарным диагностикумом, а также
РИФ.

При
проведении бактериологического
метода
делают посев на кровяной или сывороточный
агар с добавлением антибиотиков
ванкомицина, амфотерицина или ристомицина.
Инкубируют при температуре 370С
и доступе углекислоты в течение 48 часов,
идентифицируют культуру по культуральным,
морфологическим и биохимическим
свойствам. Дополнительно в реакции
агглютинации определяют серогруппу, а
в реакции преципитации серовар
возбудителя.

Дифференцируют
менингококки от других видов нейссерий
– частых обитателей слизистых верхних
дыхательных путей.

Серологический
метод
используют при стертых формах
менингококковых инфекций. Выявляют
антитела в РПГА или ИФА.

Лечение

https://www.youtube.com/watch?v=ytaboutru

С
учетом крайне быстрого прогрессирования
болезни, при подозрении на менингококковую
инфекцию лечение антибиотиками должно
начинаться еще до поступления больного
в стационар и до проведения лабораторных
диагностических исследований.

Возбудитель
сохраняет полную чувствительность к
β-лактамам, отсюда препаратом выбора
является бензилпенициллин (пенициллин
G).
В случае аллергии на пенициллины
применяют цефтриаксон, хлорамфеникол
или азалиды.

Назначается
дезинтоксикационная инфузионная
терапия, при синдроме токсического шока
возможно использование глюкокортикоидов.

Профилактика

Неспецифическая
профилактика включает выявление и
санацию носителей, изоляцию и лечение
больных, дезинфекцию помещений, где
находился больной до госпитализации.

По
эпидпоказаниям вводят химическую
вакцину из высокоочищенных полисахаридных
фракций менингококков группы А, С, Y,
W135. Она
обеспечивает высокий уровень защиты
до 2-3 лет после вакцинации.

Проблемой
пока остается разработка вакцины против
менингококков серогруппы В. В настоящее
время проходят клинические испытания
несколько таких вакцин, которые основаны
на белках наружной мембраны данных
возбудителей.

10.2.
Гонококки

Возбудитель
был открыт в 1879 г. немецким ученым
А. Нейссером. С его именем связано
название всего семейства – Neisseriaceae.

Культивирование грибов

1. Неселективные
среды:

  • пивное сусло (неопохмеленное
    сусло стерилизуют при 110 0С
    30 минут, затем используют его для
    приготовления:

а) сусло жидкое (разводят
водой),

https://www.youtube.com/watch?v=ytadvertiseru

б) среда Сабуро жидкая (вода,
глюкоза, пептон),

в) сусло-агар (добавляют
2-3% агар-агара);

  • среда Сабуро плотная (агар,
    пептон, глюкоза, мальтоза, вода),

  • рисовая среда Левиной
    (варят цельный рис, разбавляют водой,фильтруют, добавляют
    агар-агар),

  • среда Левина (МПА, лактоза,
    эозин, метиленовая синь),

  • среда Эндо (МПА, лактоза,
    кислый фуксин, обесвеченный щелочью),

— картофельно-глюкозный
агар (отваренный в течение 1 часа картофельрастирают, разбавляют водой,
процеживают, добавляют глюкозу иагар),

  • МПА с 2% глюкозой,

  • желатиновая среда (в бульон
    на отваре сердечной мышцы быка добавляют
    желатин),

  • 5-10% КА (агар, дополненный
    экстрактом сердца и мозга),

  • асцитический агар (агар,
    асцитическая жидкость).

2. Селективные среды,
дополненные одним или комплексом
антибиотиков: пенициллином (20 ЕД/мл),
стрептомицином (40 ЕД/мл) или гентамицином
(0,5 мкг/мл), левомицитином (16 мг/мл).

Приложение 4

ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ
КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКОПЛАЗМ

1. 2% сердечно-мозговой агар.

2. Мясо-пептонный бульон с
30% сывороткой крови или асцитической
жидкости.

В среды добавляют нативную
сыворотку, углеводы, витамины, соли, а
дляугнетения роста
сопутствующих бактерий — пенициллин и
ацетат калия.

Для культивирования уреаплазм
используют среды, содержащие гидролизатбычьего сердца, гидролизат
казеина, пекарские дрожжи и красители:кристаллический и бромтимоловый
синий. Среды дополняют 10%лошадиной
сывороткой, 0,05% мочевины, 2% а-цистеина
и антибиотиков(пенициллин).

Рост в виде яичницы-глазуньи.

Приложение 5

Приложение 4

Приложение 5

9.3.1. Бактерии рода Leuconostoc

Бактерии
рода Leuconostoc
выделены из клинического материала
Handwerger в середине 80-х годов прошлого
века.

Leuconostoc
– грамположительные, каталазонегативные,
неспорообразующие, неподвижные,
факультативно анаэробные кокки, широко
распространенные в окружающей среде.

Классификация

Род
Leuconostoc
включает 9 видов, из них L.
mesenteroides и
L. lactis
выделяют чаще из молока и молочных
продуктов, L. pseudomesenteroides
и L. citreum
обнаруживаются на растениях, овощах,
молочных продуктах, L.
gelidum и L.
carnosum выделяются
из мяса и мясных продуктов, L.
fallax – из
консервированных, L.

https://www.youtube.com/watch?v=https:accounts.google.comServiceLogin

argentinum
– выделен в Аргентине из непастеризованного
молока. Эти микроорганизмы чаще выделяют
при инфекциях у больных с иммунодефицитами
(при злокачественных новообразованиях,
длительной катетеризации, из
интраабдоминальных абсцессов, абсцессов
печени, из раневого отделяемого при
послеоперационных инфекциях).

К
факторам патогенности данных возбудителей
относится лейкоцидин (бактерицин),
инактивирующий протеолитические
ферменты и бактерицидный в отношении
лактобактерий.

Клиническое
значение имеет выделение микроорганизмов
рода Leuconostoc
только из заведомо стерильных источников
(кровь, ликвор, перитонеальная и суставная
жидкость). Материал засевают на кровяной
агар, где микроорганизмы дают рост
мелких колоний с альфа-гемолизом. При
идентификации учитываются следующие
признаки: каталазный тест отрицательный,
образуют газ на средах с глюкозой, не
вызывают гидролиз аргинина, растут при
температуре 10оС.

Лечение

Пенициллин,
ампициллин, клиндамицин.

9.4. Семество Enterococсаeae

Семество
Enterococсаeae
включает род Enterococcus,
включающий
более 10 видов.
Наиболее часто от человека выделяют 2
основных вида – E. faecalis
и E. faecium.
Это условно-патогенные микроорганизмы,
вызывающие оппортунистические инфекции
мочевыводящих путей, желчных путей,
абсцессы брюшной полости, подострый
септический эндокардит, сепсис. Данные
возбудители отличаются весьма широким
спектром резистентности к антибиотикам.
E. faecium
обычно более устойчив, чем E. faecalis.

9.4.1. Род Enterococcus

Род
Enterococcus
объединяет
кокковидные бактерии, которые в мазках
располагаются попарно или короткими
цепочками. Спор не образуют, некоторые
виды подвижны (имеют жгутики); капсул
не имеют. Факультативные анаэробы,
хемоорганотрофы, метаболизм ферментативный,
расщепляют углеводы с образованием
кислоты; каталазоотрицательны, иногда
восстанавливают нитраты в нитриты.

Хорошо
растут в интервале 10-45°С
на простых питательных средах, устойчивы
к действию окружающей среды, выдерживают
нагревание до 60°С
в течение 30 минут. Теллурит калия, азид
натрия, желчные соли, кристаллический
фиолетовый, налидиксовая кислота,
пенициллин, неомицин, цефалоспорины не
угнетают роста энтерококков, что
используется для создания элективных
питательных сред и проведения
микробиологической диагностики.

На
средах с теллуритом калия дают черные
колонии вследствие восстановления
теллура.

На
кровяном агаре образуют негемолитические
или α-гемолитические колонии.

В
качестве селективных и
дифференциально-диагностических сред
применяют желчно-щелочной агар (растут
только энтерококки), молочную среду с
метиленовым синим (определяют
восстановление метиленового синего),
среду с трифенилтетразолий-хлоридом
(ТТХ). На последней среде оценивают
гемолиз и способность восстанавливать
ТТХ.

Представители
рода Enterococcus
относятся к серогруппе D
согласно серологической классификации
Р. Ленсфильд

Энтерококки
обладают генетически детерминированной
устойчивостью к многим β-лактамам,
включая пенициллиназоустойчивые
пенициллины и цефалоспорины. Также они
проявляют умеренный уровень резистентности
к фторхинолонам и аминогликозидам.
Штаммы энтерококков, продуцирующие
β-лактамазу, обычно устойчивы к
аминогликозиду гентамицину.

Увеличивается
частота обнаружении изолятов энтерококков,
устойчивых к ванкомицину. Механизм
данного вида резистентности связан с
изменением структуры клеточной стенки
энтерококков.

Кроме
того, в организме человека энтерококки
устойчивы и к сульфаниламидам, включая
бисептол.

https://www.youtube.com/watch?v=upload

Отсюда
при подозрении на энтерококковую
инфекцию (например, при подостром
септическом эндокардите) проводят
посевы материала на селективные и
дифференциально-диагностические среды
для энтерококков и идентифицируют ихпо
вышеуказанным свойствам. Видовая
идентификация возбудителей возможна
также с помощью автоматизированных
систем биохимической идентификации
микроорганизмов, а также генетическими
методами (ПЦР).

Лечение
данных инфекций представляет сложную
задачу. Используются комбинации
антибиотиков, наиболее эффективных в
отношении энтерококков. Они включают
пенициллин, ампициллин или ванкомицин
в сочетании с аминогликозидами
(стрептомицином или гентамицином).

10.1.1. Менингококки

Классификация

Морфология

Резистентность

Лечение

Профилактика

10.2.
Гонококки

Классификация

Семейство
Neisseriaceae,
род Neisseria,
вид N. gonorrhoeae.

Neisseria
gonorrhoeae
вызывают тяжелое гнойно-воспалительное
поражение урогенитального тракта –
гонорею
и бленнорею
(гонококковый конъюнктивит новорожденных,
которые инфицируются при прохождении
через родовые пути больной матери).

https://www.youtube.com/watch?v=ytpolicyandsafetyru

Генетически
гонококки весьма близки менингококкам
(более 70% гомологии ДНК). Тем не менее,
имеющиеся между ними отличия, приводящие
к возникновению самостоятельных
инфекционных процессов, обеспечивают
их принадлежность к разным видам
возбудителей.

Морфология

Гонококки
– мелкие грамотрицательные парные
кокки бобовидной формы; не имеют спор,
жгутиков. В отличие от менингококка не
имеют капсулы. Имеют многочисленные
адгезины в составе пилей, которые
обеспечивают адсорбцию возбудителя на
цилиндрическом эпителии урогенитального
тракта.

Гонококки
очень прихотливы к питательным средам.
Растут только на средах с человеческим
белком (кровяной, сывороточный,
асцитический агары), рН среды 7,2-7,4,
оптимальная температура роста 370С.
На этих средах гонококки могут давать
два вида колоний. Вирулентные особи,
имеющие пили, образуют мелкие, блестящие,
бесцветные, прозрачные или с помутнением
(последний признак зависит от синтеза
Opa-белков).

По
типу дыхания гонококки являются аэробами
или факультативными анаэробами.

Из
углеводов разлагают только глюкозу до
кислоты, не образуют аммиака, индола,
сероводорода.

Выделяют каталазу,
оксидазу,

Антигенная
структура

Обладают
широким набором белковых и полисахаридных
антигенов, основная часть которых весьма
вариабельна.

В
состав пилей входит белок-антиген пилин
(более 100 вариантов); в состав пор – белкипорины
PorA
(18 вариантов) и PorB(28
вариантов). Многими модификациями
представлены Ора-белки,
играющие важную роль в адгезии.

Полисахаридные
антигены входят в состав липоолигосахарида
(ЛОС),
который, в отличие от ЛПС других
грамотрицательных бактерий, не имеет
длинных боковых цепей О-антигена.

Антигенными
свойствами также обладают IgA-протеазы.

Смена
антигенных вариантов у гонококков
(фазовая вариация) обеспечивается
генетическими механизмами. Происходит
генетическое переключение между
аллельными генами, кодирующими разные
формы одного белка. Частота данного
процесса высока (1 на 1000 микробных
клеток). Это позволяет возбудителю
постоянно менять свой фенотип, ускользая
от иммунного ответа.

Кроме
того, часть антигенов имеет мозаичное
строение и кодируется несколькими
генными сегментами, что также увеличивает
их структурную изменчивость.

Резистентность

Гонококки
очень неустойчивы к действию факторов
окружающей среды. Разрушаются при
температуре выше 400С
и резком охлаждении, чувствительны к
нитрату серебра в разведении 1:10 000, к 1%
раствору фенола, 0,05% раствору хлоргексидина,
к антибиотикам.

Факторы
патогенности

— пили
обеспечивают прикрепление гонококков
к эпителиальным клеткам, в адгезии
участвуют пилины, порины и Ора-протеины;
лишенные пилей бактерии авирулентны;

— Ора
и Por-белки
стимулируют внутриклеточную инвазию
возбудителя и угнетают фагоцитоз,
препятствуя образованию фаголизосомы;

— липоолигосахарид
обладает токсичным действием (эндотоксин),
стимулирует воспаление;

— IgА1-протеазы
гидролизуют секреторные IgА, нарушая
местный иммунитет слизистых оболочек;
кроме того, они способны разрушать
некоторые белки фагоцитов, подавляя
фагоцитоз;

— β-лактамазы
инактивируют пенициллины, цефалоспорины;

— рецепторы
к трансферрину
обеспечивают поступление железа в
микробные клетки; штаммы, не имеющие
данных рецепторов, авирулентны;

— в
отличие от менингококков, гонококки
имеют плазмиды,
которые обеспечивают их способность к
конъюгации и устойчивость ко многим
антибиотикам; в целом для гонококков
характерна высокая частота генетического
переноса между отдельными клетками.

Патогенез
и клиническая характеристика заболевания

Заболевание
антропонозное. Источник инфекции –
больной человек. Путь передачи – половой,
реже контактный. Имеют большое значение
вирулентность возбудителя и специфическая
резистентность организма. В
целом для инфекции достаточно 103
клеток высоковирулентного штамма.

При
незащищенном половом контакте вероятность
инфекции для женщин – до 50%, мужчин –
30-50%.

Входные
ворота – цилиндрический эпителий уретры
(особенно у мужчин), шейки матки, в
отдельных случаях – эпителий конъюнктивы,
прямой кишки. Гонококки адсорбируются
на поверхностных структурах клеток
цилиндрического эпителия. Пилины
взаимодействуют с сиалированными
клеточными рецепторами (например, CD46),
Ора-белки – с молекулами CD66
и протеогликанами.

Происходит
внутриэпителиальная инвазия возбудителя.
Далее гонококки проникают в субэпителиальный
слой и активируют острое местное
воспаление. Воспаление поддерживается
выделением из микробных клеток фрагментов
пептидогликана и липоолигосахарида,
при этом возбудитель может сохранять
жизнеспособность.

Лейкоциты
поглощают возбудителя по принципу
эндоцитоза. Выражен незавершенный
фагоцитоз. Гонококки размножаются
внутри фагоцитов, при этом выделяются
провоспалительные цитокины и хемокины.
При переходе воспаления в хроническую
форму происходит усиление синтеза
соединительной ткани с фиброзом
воспалительного очага, что приводит к
осложнениям заболевания, включая
бесплодие.
Если гонококки проникают в кровь, то
возможна диссеминация процесса с
поражением кожи и суставов.

Выделяют
острую и хроническую форму гонореи
(обычно более двух недель). У мужчин
заболевание протекает преимущественно
остро, в виде уретрита с дизурией и
обильными гнойными выделениями. У женщин
более чем в 50% случаев болезнь протекает
стерто, может принимать первично-хроническую
форму, отсюда увеличивается риск передачи
инфекции при половом контакте.

При
распространении инфекции у мужчин
возникают эпидидимит, орхит, у женщин
– вульвовагинит, эндометрит, сальпингит,
процесс может переходить на брюшину. В
отсутствие лечения распространяющийся
фиброз и спайки ведут к стриктурам
уретры, обтурации семявыносящего
протока, фаллопиевых труб, что приводит
к бесплодию.

Иммунитет
не формируется вследствие выраженной
изменчивости возбудителя. Антитела
защитной роли не играют.

При
беременности и родах матери с гонококковой
инфекцией возможно развитие острого
гнойного конъюнктивита (бленнореи)
у новорожденного. В отсутствие профилактики
это может приводить к потере зрения.

Материал:
отделяемое из уретры, цервикального
канала, при бленнорее – отделяемое
конъюнктивы глаза, при диссеминированной
инфекции – кровь.

Бактериоскопический
метод.
Выявляют грамотрицательные парные
бобовидной формы кокки, незавершенный
фагоцитоз.

Бактериологический
метод
используют при стертых формах гонореи.
Делают посев на подогретые сывороточные
среды в инкубаторах с доступом 5-10%
углекислоты. Колонии бесцветные, мелкие.
Идентификация возбудителя проводится
по морфологическим свойствам при
микроскопии культуры; по биохимическим
свойствам (разлагают только глюкозу,
выделяют цитохромоксидазу); по антигенным
свойствам в реакции преципитации.

Экспресс-диагностика
направлена на выявление антигена в
исследуемом материале. Для этого
используют РИФ или ИФА.

Серологический
метод имеет
ограниченное значение вследствие
высокой вариабельности возбудителя.
Может применяться при хронической и
стертой форме гонореи. Для определения
антител используют ИФА.

В
качестве подтверждающего теста для
определенияв
материале
нуклеиновой кислоты возбудителя
могут применяться методы ПЦР.

Лечение

В
настоящее время происходит повсеместное
нарастание устойчивости гонококков к
большинству назначаемых антибиотиков.
Это связано с высокой изменчивостью и
быстрой адаптацией возбудителя. Отсюда
препараты, которые широко применялись
ранее (например, бензилпенициллин или
тетрациклин), в настоящее время не
используются. Возможно применение
фторхинолонов, однако постепенно
происходит рост устойчивости гонококков
и к фторхинолонам.

Отсюда
для лечения рекомендуются эффективные
цефалоспорины III
поколения (цефтриаксон), азитромицин
или доксициклин. Тем не менее, в 2011 г.
впервые описаны штаммы гонококков,
устойчивые к цефтриаксону. Для лечения
в этих случаях рекомендованы комбинации
вышеуказанных препаратов.

При
хронической или стертой форме гонорее
иногда вводят гоновакцину из
инактивированных штаммов гонококка.

Профилактика

https://www.youtube.com/watch?v=ytdevru

Основные
меры профилактики неспецифические. Для
профилактики бленнореи новорожденным
закапывают в глаза 30% раствора сульфацила
натрия (альбуцида), за
рубежом применяют глазные мази с
азитромицином или тетрациклином.

Оцените статью
Все про антибиотики
Adblock detector